原代细胞分离培养都有哪几种方法？

　　研究中常用的细胞系/株系是现成的，我们只需要进行细胞传代和种子保存。然而，这些细胞系往往因长期体外培养而失去原有的生物学特性，对药物治疗的反应差距越来越大。因此，越来越多的人选择原代细胞。来源于胚胎、组织、器官和外周血，经特殊分离方法制备的原代培养细胞称为原代细胞。原代细胞培养，也称为原代培养，是从供体获得的组织细胞在体外的培养。

　　

　　原代细胞是接近和最能反映体内生长特性的细胞，适用于药敏试验、细胞分化等实验研究。原代细胞分离培养都有哪几种方法？

　　

　　1、组织培养法

　　

　　组织培养是一种常见、简单且成功的原代细胞分离培养方法。基本方法是将切下的小组织块接种到培养瓶（或培养皿）中。瓶壁可预先涂上一层薄薄的胶原蛋白，以利于组织团粘附在瓶壁上，使周围的细胞沿瓶壁向外生长。

　　

　　2、消化培养法

　　

　　组织消化法是将组织切成小块（或糊状），通过酶的生化作用和非酶的化学作用，使细胞间的桥接结构进一步松散，使团块由团块变成絮状。此时，采用机械法用稻草吹散细胞团块，或在摇瓶中进行电磁搅拌或摇动，使细胞团块充分分散，制成少量细胞团块和大量单细胞细胞悬液，接种培养后，细胞易贴壁生长。

　　

　　3、悬浮细胞培养

　　

　　悬浮生长的细胞，如胸水和腹水中的白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、癌细胞和免疫细胞，不需要被消化。可以低速离心分离直接培养，也可以用淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　

　　4、器官培养

　　

　　器官培养是指从供体获得的器官或组织块在体外特定环境条件下不进行组织分离的培养，器官培养可以保持器官和组织的相对完整性，可用于观察细胞之间的连接、排列和相互作用，以及局部环境的生物调节。