细胞培养时要满足这些培养条件

细胞培养是一种重要的生物学技术，可以使研究人员在体外繁殖和研究细胞，已经广泛应用于医学、生物学、农业、食品工业等领域，成为现代生命科学的重要组成部分。细胞培养是将细胞放入一定的培养基中，提供适宜的培养环境，使其在体外繁殖和生长。基本原理是在一定的培养基中提供足够的营养物质和适宜的生长条件，如温度、湿度、氧气、二氧化碳等，使细胞能够不断繁殖和生长。随着技术的不断发展，现在已经可以培养各种类型的细胞，包括哺乳动物细胞、微生物细胞、植物细胞等。细胞培养需要提供适宜的培养条件，如温度...

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细胞培养瓶有三种容量规格可选

一些细胞和组织可在悬浮状态下生长,但相当一部分哺乳动物细胞需要表面贴壁。因此,用于提供细胞体外培养环境的培养瓶、培养板和培养皿除了具有良好的透明度和无毒、无菌外，还需经表面改性处理使之能够贴壁、分裂和生长。细胞培养瓶瓶体设计合理，表面TC处理，适用于实验室中等规模细胞和组织培养。细胞培养瓶是实验室进行长时间细胞培养、大量细胞扩增和防污染的合适培养器皿。未处理表面适用于悬浮细胞培养；TC处理表面，经过处理后聚苯乙烯表面具有较好亲水性，适用于常见细胞系的粘附和伸展；超亲水处理表面...

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细胞凋亡时会出现哪些形态学变化？

凋亡（Apoptosis），或者说程序性细胞死亡（Programmedcelldeath），是细胞内建的防御机制之一，在生物的正常发育及疾病抵御中起到重要的作用。凋亡过程与通路的异常，会导致多种疾病，包括肿瘤。目前至少有十数种检测细胞凋亡的方法，从大框架上讲，可以划分为基于细胞形态、生物学功能和生化标记三大类。然而，每一种方法都有其优缺点，且并非所有的方法对每一位实验人员来说都是实用的。细胞凋亡（Apoptosis）是细胞程序性死亡（Programmedcelldeath）的...

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原代细胞分离培养中的注意事项

原代培养的细胞，来源于胚胎、组织器官和外周血，通过特殊的分离方法制备，称为原代细胞。初步分离得到的细胞具有与体内细胞相似的生物学特性，是研究生进行与物体相关的生命活动的理想材料。原代细胞分离培养是从体内取出人/小鼠模型动物特异性细胞，用胰蛋白酶和螯合剂(EDTA)处理，分散成单细胞，并在合适的培养基中培养，使得细胞能够存活、生长和繁殖的过程。原代培养是指细胞、组织和器官直接从体内取出后立即进行培养。此时的细胞保持了原细胞的基本性质，如果是正常细胞，则仍保留二倍体数。但实际上，...

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原代心肌细胞间的培养都有哪些抗污染措施？

成纤维细胞比心肌细胞更容易贴壁，具有分裂增殖能力。差异贴壁后，原代心肌细胞间中仍有少数成纤维细胞混杂，如果处理不当，很容易长成优势细胞。溴脱氧尿苷(BrdU)可以干扰细胞有丝分裂，因此BrdU常规用于抑制成纤维细胞的生长。但如果用胎牛血清培养细胞，由于胎牛血清含有很多促有丝分裂因子，BrdU很难抑制成纤维细胞的生长。使用小牛血清可以克服这种现象，获得90%以上的心肌细胞。观察原代心肌细胞间形态时，接种密度低，贴壁心肌细胞数量减少。为了防止存活的心肌细胞随着液体的更换而被丢弃，...

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细胞外泌体的组成都包括什么？

细胞外泌体是细胞分泌的大小约为30-150nm的纳米物质，是细胞外囊泡的一类，结构类似于细胞，磷脂双分子层表面具有多种特异性膜蛋白，内部搭载着多种蛋白质、RNA、DNA等重要生物信号物质，广泛分布于血液、尿液、脑脊液、唾液、乳汁、胆汁等各种体液中。外泌体的来源细胞种类非常丰富，几乎在人体血液、尿液、母乳和唾液等多种体液中都能发现它的踪迹。可传递包括DNA、RNA、miRNA、脂质和蛋白质在内的多种生物活性物质，同时保护包裹的内含物免受核酸酶和蛋白酶，以及外界坏境变化引起的降解...

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细胞增殖分析（CCK-8 法）

CellCountingKit-8（简称CCK-8）试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。CCK-8&MTT方法比较方法优点缺点CCK-8法灵敏度高、不使用有机溶剂、检测迅速、重复性好价格较MTT贵、CCK8试剂的颜色为淡红色、与含酚红的培养基颜色接近，容易漏加或多加MTT法价格便宜操作步骤较多，需要使用有机试剂，灵敏度不如CCK-8，多数需要配制，检测时间长，细胞毒性较高一、原理：CCK-8是MTT的升级产品，其基本原理为：该试剂中含有WST-8【化学名：2-(2-甲氧...

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从肝脏组织中制备细胞核

一、材料与仪器：大鼠、裂解缓冲液、浓蔗糖溶液、超速离心机、组织研磨器二、实验步骤：1.配制裂解缓冲液和浓蔗糖溶液（PMSF在使用前添加），冰上放置。裂解缓冲液:①0.25mol/L蔗糖网织红细胞标准缓冲液（RSB）②0.25mol/L蔗糖（超级纯）③10mmol/Tris-HCl(pH7.4)④10mmol/LNaCl⑤3mmol/LMgCl2⑥1mmol/LDTT⑦0.5mmol/LPMSF(用前从溶于乙醇的100mmol/L贮存液中添加）浓蔗糖溶液:①2mol/L蔗糖RS...

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